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FlaPure Mini Plasmid Kit 高纯度质粒DNA小量提取试剂盒 (PE707)

FlaPure Mini Plasmid Kit 高纯度质粒DNA小量提取试剂盒 (PE707)

改良的SDS碱裂解法,30 min可提取高纯度质粒

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商品描述

改良的SDS碱裂解法,30 min可提取高纯度质粒




产品特点


 操作简便:在30 min内可完成多个样品的质粒DNA提取;

 高效:可提取菌体85%以上的质粒DNA




产品简介 


本试剂盒采用改良的SDS-碱裂解法,结合先进的硅胶膜吸附技术,可达到快速纯化质粒DNA的目的。适用于从1~4 mL的细菌培养物中提取多至20 μg高纯度的质粒DNA,提取的质粒DNA可用于酶切、PCR、测序、细菌转化、体外转录与翻译等分子生物学实验。




产品组成



组分

规格50次)

规格200次)

RNase A(100 mg/mL)

15 μL

60 μL

Buffer P1

15 mL

60 mL

Buffer P2

15 mL

60 mL

Buffer P3

20 mL

80 mL

Buffer W1

24 mL

75 mL

Elution Buffer

15 mL

25 mL

吸附柱EC

50

200套




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Q1:质粒DNA产量低?

A1:

1) 质粒拷贝数低。载体因拷贝数差异会造成质粒产量明显的波动。高拷贝数的载体常有2 ~3倍的产量波动(每毫升培养过夜的菌液,高拷贝数的质粒载体产量为3 - 16 μg)。长片段质粒和表达型载体常以中低拷贝数为主,每毫升菌液的产量约为0.5~2 μg;

l低拷贝质粒:pBR322, pACYC及其衍生载体,pSC101及其衍生载体,SuperCos, pWE15;

l高拷贝质粒:pTZ, pUC, pBS, pGM-T。

2) 菌种问题。菌种保存过程中存在质粒丢失现象,培养细菌前最好先划线活化,以稳定产量;

3) 细菌未充分裂解。细菌须在Buffer P1/RNase A 中充分重悬,成团的细菌因无法裂解会降低产量;

4) 试剂准备有误。Buffer P2若有沉淀析出需加热溶解,Buffer W1加入乙醇体积不准确;

5) 洗脱效率低。将Elution Buffer 预热至60~65℃,并进行二次洗脱。

 

Q2:质粒DNA中有基因组DNA污染?

A2

1) 菌液培养时间太长。菌液培养时间需控制在12 ~16 h;

2) 裂解问题。加入Buffer P2时,必须轻柔颠倒混匀;处理多个样品时,加入Buffer P2时算起,总时间不要超过5 min。


说明书:点击下载

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